ИЗУЧЕНИЕ МОЛЕКУЛЯРНЫХ МЕХАНИЗМОВ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ШТАММОВ CORYNEBACTERIUM DIPHTHERIAE К РИФАМПИЦИНУ

О.Ю. Борисова, доктор медицинских наук, доцент, И.А. Чагина, кандидат медицинских наук,
В.А. Алешкин, доктор биологических наук, профессор
Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского, Российская Федерация, 125212, Москва, Адмирала Макарова, д. 10
E-mail: olgborisova@mail.ru

Введение. Пенициллин и макролиды применяются для санации дифтерийных бактерионосителей, в комплексной терапии отдельных форм дифтерии, а также для лечения инвазивных заболеваний, вызванных нетоксигенными Corynebacterium diphtheriae. В 1990-е годы была показана высокая эффективность также рифампицина. Неэффективность антибиотикотерапии может объясняться врожденным или приобретенным нарушением колонизационной резистентности слизистых оболочек, дисбиозом ротоглотки и носа, а также резистентностью штаммов C. diphtheriae к антибиотикам. Цель. Оценить антибиотикочувствительность и установить молекулярные механизмы резистентности штаммов C. diphtheriae к рифампицину. Материал и методы. Изучено 664 штамма C. diphtheriae, выделенных в 1987–2014 гг. в разных регионах России. Определение антибиотикочувствительности штаммов С. diphtheriae осуществляли 2 методами: диско-диффузионным и методом E-test. Установление молекулярных механизмов резистентности проводили с помощью праймер-специфической полимеразной цепной реакции и секвенирования. Результаты. Большинство штаммов оказались чувствительными к рифампицину, 0,15% штаммов имели промежуточный уровень резистентности, 4,7% – были резистентными. По данным E-test, 41,9% штаммов были полностью резистентными, для 58,1% штаммов минимальная ингибирующая концентрация – 16–32 мкг/мл. Установлено, что резистентность штаммов С. diphtheriae обусловлена наличием мутационных изменений в гене rpoB. Мутационные изменения выявлены в 29 позициях, в 26 из них мутации не сопровождались изменениями на аминокислотном уровне. В 3 позициях (1291, 1307 и 1484) выявлены значимые мутации, сопровождающиеся изменениями на аминокислотном уровне – в положениях Н431N; S436F или S436Y, Р495L или Р495Q, которые локализуются в центральной части полипептида в 1-м кластере гена rpoB. Заключение. На территории России циркулируют штаммы C. diphtheriae, резистентные к рифампицину в 4,7% случаях. Впервые расшифрован молекулярный механизм резистентности штаммов C. diphtheriae к этому антибиотику, обусловленный мутационными изменениями в 3 позициях гена rpoB (1291, 1307 и 1487).
Ключевые слова: 
Corynebacterium diphtheriae, рифампицин, резистентность, мутации